Lupita Nyong'o, 1 Mart 1983 tarihinde Meksika'nın Mexico City şehrinde doğmuştur. Ailesi, Kenyalı kökenlere sahip olup, Nyong'o'nun çocukluğu büyük ölçüde Kenya'da geçmiştir. Eğitimine Meksika'da başlayan Nyong'o, daha sonra ABD'ye giderek Yale Üniversitesi'nde Drama eğitimi almıştır. Sanat kariyerine tiyatro ile başlayan Nyong'o, kısa sürede sinema dünyasında da kendine sağlam bir yer edinmiştir.

Lupita Nyong'o, 2013 yılında "12 Years a Slave" adlı filmdeki Solomon Northup'un kızı Patsey rolü ile büyük bir çıkış yakalamıştır. Bu performansı ona En İyi Yardımcı Kadın Oyuncu dalında Akademi Ödülü kazandırmıştır. Nyong'o, bu filmden sonra "Star Wars: The Force Awakens" ve "Black Panther" gibi büyük yapımlarda da rol alarak Hollywood'un en çok aranan oyuncularından biri haline gelmiştir. Ayrıca, "Us" ve "Little Monsters" gibi korku filmlerinde de dikkat çekici performanslar sergilemiştir.

Lupita Nyong'o, sadece oyunculuk kariyeri ile değil, aynı zamanda yönetmenlik çalışmalarıyla da tanınmaktadır. 2015 yılında "In My Genes" adlı belgeseli yönetmiş ve bu filmde Kenya'daki albinizm konusunu ele almıştır. Ayrıca, 2021 yılında "The Last Black Man in San Francisco" adlı filmde de yönetmenlik yapmıştır. Bu projeler, onun sanatçı kimliğini daha da güçlendirmiştir.

Nyong'o, kariyeri boyunca birçok ödül kazanmıştır. Akademi Ödülü'nün yanı sıra, BAFTA, Screen Actors Guild ve Critics' Choice ödülleri gibi prestijli ödülleri de kazanmıştır. Ayrıca, 2014 yılında "People" dergisi tarafından "Dünyanın En Güzel Kadınları" listesinde yer almıştır. Nyong'o, hem oyunculuğu hem de toplumsal konulara duyarlılığı ile sinema dünyasında önemli bir figür haline gelmiştir.